2013初级药士考试辅导:兔魏氏梭菌微生物学检验
更新时间:2013-04-01 09:31:35
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摘要 兔魏氏梭菌微生物学检验
采取病兔或死兔的空肠、回肠、盲肠内容物、肠黏膜或粪便等作被检病料。
涂片镜检:将被检材料直接涂片,作革兰氏染色镜检,可见有革兰氏阳性大杆菌,一般很少见到芽孢。
分离培养:将病料接种于熟肉培养基,置37℃温箱培养,或接种于DS培养基,亦可置37℃温箱培养。5~6小时后培养基变得很混浊,并产生大量气体。在有气体出现时(一般在4~6小时)进行传代(2~3次)可获纯培养物。或者将检验材料直接接种于鲜血琼脂平皿培养基,或葡萄糖鲜血琼脂平皿培养基,或乳糖牛奶卵黄琼脂平皿培养基,置于厌氧罐中于37℃温箱培养24小时。魏氏梭菌在鲜血琼脂或葡萄糖鲜血琼脂平皿上,形成圆形、凸起的单个菌落,大小2~4毫米,呈半透明、表面光滑、边缘整齐;有些菌株,菌落中心凹陷,表面呈放射性条纹状,边缘呈锯齿状。菌落周围出现双溶血圈。在乳糖―牛奶―卵黄琼脂平皿上,菌落周围和下面出现乳浊带。由于发酵乳糖,菌落周围呈红色晕环,但表面不形成虹彩层。最后根据典型菌落特征,挑取菌落,接种于鲜血斜面培养基,供以下各种特性检验之用。
镜检:涂片后进行革兰氏染色,镜检为革兰氏阳性、粗大杆菌,很少见有芽孢。
生化反应:将纯培养物接种于糖、醇类等生化反应培养基。魏氏梭菌能发酵葡萄糖、乳糖、麦芽糖、蔗糖等,靛基质阴性,硫化氢阳性。
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