初级检验技师辅导:单克隆抗体的制备技术
更新时间:2010-11-16 15:26:29
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初级检验技师辅导:单克隆抗体的制备技术
单克隆抗体的制备技术
(1)单克隆抗体的产生:它主要通过动物体内诱生方法和体外培养方法进行培养产生的。
(2)单克隆抗体的纯化:常用的方法有盐析、凝胶过滤、离子交换层析和辛酸提取等方法。
(3)单克隆抗体性质鉴定:常用的方法有放免测定,补体介导溶血试验,ELISA,免疫酶,玫瑰花结形成试验等,最常用的为ELISA方法。
4.基因工程抗体技术
(1)人源化抗体:如人—鼠嵌合抗体和抗体的表面修饰,使Fv表面人源化。
(2)小分子抗体:可在大肠杆菌等原核细胞表达,在人体内穿透力强,有利于疾病的治疗。
(3)抗体融合蛋白:将抗体分子片段与其他蛋白融合,得到多样性生物功能的融合蛋白。
(4)双特异性抗体:能同时结合两种抗原,可介导标记物与靶抗原结合或某些效应因子定位于靶细胞。
(5)抗体库技术:是指将全套抗体重链及轻链可变区基因克隆出来,筛选到特异的可变区基因。
例题(多选):在杂交瘤技术中细胞融合的选择培养基有三种关键成分:
A. 氨甲蝶呤 B. 次黄嘌呤 C.胞嘧啶 D. 胸腺嘧啶核苷
答案:ABD
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