初级检验技士：脑膜炎奈瑟菌微生物学检验

　　初级检验技士：脑膜炎奈瑟菌微生物学检验

　　微生物学检验

　　(1)标本采集：菌血症期时采血液;出现出血点或瘀斑者采取瘀斑渗出液;出现脑膜刺激症时可抽脑脊液;上呼吸道感染期的和带菌者可取鼻咽分泌物。

　　注意：该菌能产生自溶酶，易自溶，故采集时标本不宜放冰箱，应保温立即送检。必要时可作双份血清测定抗体效价的变化。

　　(2)检验方法及鉴定：

　　1)直接涂片检查：

　　①瘀血斑：刺破瘀斑血印片，或血膜片，干燥固定后革兰染色阴性双球菌，呈肾形成对排列，可初诊。

　　②脑脊液：取脑脊液离心后沉淀物涂片，干燥固定后革兰染色，若发现中性粒细胞内或胞外革兰阴性双球菌，呈肾形成对排列，结合临床可确诊。

　　2)分离培养：将标本葡萄糖肉汤增菌培养液，直接接终于血琼脂平板、巧克力琼脂平板，置于5%-10%CO2环境中，35℃培养18-24小时后可见圆形、灰褐色、湿润、光滑、边缘整齐、直径1-2mm的小菌落，经涂片证实为革兰阴性双球菌，并进一步根据相应的生化反应等试验予以鉴定。

　　3)鉴定：该菌鉴定主要通过氧化酶、糖类发酵和血清学等试验以及培养生长特点进行。

　　①细菌染色形态;

　　②氧化酶试验阳性;

　　③触酶试验阳性;

　　④分解葡萄糖、麦芽糖产酸不产气;

　　⑤荚膜多糖抗原直接凝集试验。

　　(3)结果评价和报告

　　重视脑脊液和瘀点穿刺物的直接镜检，这是最快速确证脑膜炎奈瑟菌的简便方法。

　　直接镜检为革兰染色阴性双球菌，可初报，经分离培养后见菌落特征典型、生化反应能力弱，只分解葡萄糖、麦芽糖、产生少量酸，氧化酶试验阳性，可报“检出脑膜炎耐瑟菌”。快速乳胶凝集试验阳性。

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