主管检验技师考试辅导：红细胞计数

　　主管检验技师考试辅导：红细胞计数 $lesson$

　　红细胞计数

　　方法学评价 手工显微镜法 传统方法

　　血液分析仪法 常用

　　质量控制 手工方法：样本、操作、器材、固有误差

　　[参考值] 成年男性：(4.0～5.5)×1012/L

　　成年女性：(3.5～5.0)×1012/L

　　初生儿：(6.0～7.0)×1012/L

　　1、红细胞计数原理和方法、参考值及临床意义

　　改良Neubauer(牛鲍)计数板构造：两个计数室，计数室两侧各有一条支柱，比计数室高0.1mm,将计数专用盖玻片覆盖其上时，盖玻片底面与计数室表面形成0.1mm的间隙。

　　每个计数室边长为3mm，划成长宽均为1mm的9个大方格，面积为1mm2，加盖片后容积为0.1mm3。每个计数室四角上的四个大方格用单线划成16个中方格，用于白细胞计数;中央大方格用双线划成25个中方格，其中位于4角的四个和中间一个共5个中方格为红细胞计数区，每个中方格又用单线划成16个小方格。

　　2、计数原理：

　　(1)手工显微镜法 用等渗稀释液将血液稀释一定倍数，充入血细胞计数池，计数一定体积内的红细胞，经换算求出每升血液中红细胞数量

　　(2)血液分析仪法 利用电阻抗和(或)光散射原理

　　3、方法：

　　显微镜计数:将血液标本用等渗稀释液稀释后，充入血细胞计数池，在高倍镜下，计数计数池中央大方格中4个角中方格和中央1个中方格的红细胞数，再换算成每升血液中的红细胞数。

　　稀释液：①赫姆(Hayem)稀释液：主要成分有氯化钠(调渗透压)、结晶硫酸钠(提高相对比密和防止细胞粘连)、氯化高汞(防腐剂)。②甲醛枸橼酸盐稀释液：其中氯化钠起调渗透压的作用，枸橼酸钠抗凝和维持渗透压，甲醛固定红细胞和防腐。③生理盐水用于急用时。

　　4、计数注意事项：

　　(1)标本：必须新鲜、采血量准确、吸血要快、放血要慢。充液过多、多次充液、产生气泡或充液后盖片移动，均可使细胞分布不均，使计数结果偏低。血液发生凝固，如取血动作缓慢、或用力挤压使混入组织液、或吸管内残余酒精均可影响计数结果。

　　(2)混匀：混匀时避免气泡过多

　　(3)计数器材如试管、定量吸管、计数板均须清洁。

　　(4)压线细胞遵循数上不数下，数左不数右的原则

　　5、常见计数误差：包括计数误差和固有误差

　　(1)计数误差：操作不正规或使用器材不精确造成。如使用器材不符合要求，如未校准的计数板、盖玻片不平整等;采血部位不当;稀释倍数不准;充液不当;血液凝固。

　　(2)固有误差(计数域误差)：因每次充液后细胞在计数室内分布不可能完全相同所造成，可随细胞计数增多而减小但不能消除。

　　例：现用血细胞计数盘称为：

　　A.牛巴氏计数盘

　　B.老牛巴氏计数盘

　　C.新牛巴氏计数盘

　　D.改良牛巴氏计数盘

　　E.Miller氏窥盘

　　答案：D

　　6、临床意义：

　　(1)生理性变化

　　a.年龄与性别差异：

　　新生儿：2周后逐渐下降

　　儿童：男性儿童6～7岁时最低，然后随年龄增大上升，25～30岁达高峰，

　　此后逐渐下降

　　女性儿童13～15岁达高峰，然后受月经、内分泌等影响逐渐下降，21～35

　　岁最低，然后逐渐增高与男性相近。因此在15～40岁之间两性红细胞计数

　　差别最大。可能与睾酮促进红细胞造血有关。

　　b.精神因素：兴奋、激动、恐惧、冷水浴等伴随肾上腺素增多，可导致红细胞暂时性增多。

　　c.剧烈体力运动和劳动：相对缺氧引起促红细胞生成素生成增加，骨髓加速释放红细胞。

　　d.气压降低：缺氧刺激红细胞代偿增生，高海拔地区。

　　e. 妊娠中、后期血液稀释使红细胞减少;6个月～2岁婴幼儿生长发育迅速导致造血原料相对缺乏;某些老年人造血功能明显减退等

　　(2)病理性变化：

　　a.红细胞和血红蛋白减少：最常见于各种原因的贫血。按照病因，可将贫血分成三大类

　　①急性、慢性红细胞丢失过多：如各种原因的出血，见于消化性溃疡、痔疮、十二指肠钩虫病等

　　②红细胞寿命缩短：如各种原因的溶血

　　红细胞膜缺陷：球形细胞增多症;遗传性椭圆形细胞增多症;口形红细胞增多症;棘形红细胞增多症;阵发睡眠性血红蛋白尿

　　红细胞酶缺陷：如无氧酵解途径红细胞酶缺陷如丙酮酸激酶缺陷，缺乏磷酸戊糖旁路或谷胱甘肽代谢所需酶，葡萄糖-6-磷酸脱氢酶变异等。

　　血清中抗体或补体影响：自体免疫溶血贫，药物诱发溶血贫、血型不合输血致溶血等机械损伤：微血管病性溶血贫，行军性血红蛋白尿，创伤性心源性溶血贫血

　　化学、物理、生物因素：化学毒物及药物引起溶血、大面积烧伤、感染、溶血性蛇毒

　　脾脏内阻留：脾亢

　　③红细胞生成减少：

　　造血干细胞和造血微环境损害：再障

　　红系祖细胞、幼红细胞或红细胞生成素的免疫破坏：纯红再障

　　骨髓被异常组织或细胞浸润

　　DNA合成障碍 如叶酸、B12缺乏导致的巨幼贫

　　红细胞生成素产生障碍 如慢性疾病(炎症、肾功不全)

　　血红素合成障碍 如缺铁性贫血、铁粒幼细胞性贫血、铅中毒性贫血。

　　珠蛋白合成障碍 如镰形细胞性贫血、血红蛋白C、D、E病、珠蛋白生成障

　　碍性贫血

　　b.红细胞增多：

　　原发红细胞增多：真性红细胞增多症，良性家族性红细胞增多症等

　　继发性红细胞增多：见于各种引起低氧血症的疾病如各种先心病(室缺、法四)、肺疾病(肺气肿、肺心病、肺纤维化)、异常血红蛋白病、肾上腺皮质功能亢进等。药物如肾上腺素、糖皮质激素、雄激素可引起红细胞数的增加

　　相对性红细胞增多：由于血液水分的丢失如呕吐、严重腹泻、多汗、多尿、大面积烧伤、等引起血液浓缩

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