初级检验技士辅导：白喉棒状杆菌微生物学检验
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初级检验技士辅导：白喉棒状杆菌微生物学检验 $lesson$
微生物学检验
(1)标本采集：从假膜边缘采集分泌物，立即送检。未见假膜的疑似患者或带菌者可采用鼻咽部或扁桃体黏膜上的分泌物。若为培养，应在使用抗生素或其他抗菌药物前采集双份标本。如不能立即送检，应将标本浸于无菌生理盐水或15%甘油盐水中保存。
(2)检验方法及鉴定：
1)直接镜检：标本革兰和异染颗粒染色。镜检如发现G+，形状为典型的棒状杆菌，且有异染颗粒，可初步报告“直接涂片检出形似白喉棒状杆菌”，为临床早期诊断提供依据。
2)分离培养：将另一份标本接种于下列培养基中。
①吕氏血清斜面：本菌在此培养基上生长较标本中杂菌迅速，于35℃培养8-12h后，即形成灰白色的菌落，而其他杂菌尚未形成菌落。本菌在甘油血清斜面上形成的异染颗粒更为明显;
②亚碲酸血琼脂平板：将标本接种于亚碲酸血琼脂平板，37℃培养18-24h，观察菌落特点。在此培养基上，大部分杂菌被抑制，白喉杆菌则生长缓慢，呈现1mm、黑色或灰黑色特点的典型菌落。
若在吕氏血清斜面和亚碲酸血琼脂平板上，同时发现菌落和菌体形态很典型的棒状杆菌，即可准确报告为阳性。
若在亚碲酸血琼脂平板上菌落典型，而在吕氏血清斜面阴性，也可报告为阳性。
若在吕氏血清斜面菌落及菌体形态典型，而在亚碲酸血琼脂平板上无典型菌落生长，可暂报为可疑，并将吕氏血清斜面的培养物转种于亚碲酸血琼脂平板，等待生长出典型菌落。
若两者均为阴性，必须观察 72小时后方可作出报告。
(3)生化反应：主要用于鉴别白喉棒状杆菌与类白喉棒状杆菌。
(4)毒力试验：可作为鉴定致病菌株的重要依据。试验方法分体外和体内两大类。体外法有双向琼脂扩散法、SPA协同凝集试验、对流免疫电泳;体内法可用豚鼠做毒素中和试验。