2013检验主管技师血液检验：红细胞膜缺陷的检验及其应用

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　　红细胞膜缺陷的检验包括红细胞渗透脆性试验、自身溶血试验及其纠正试验、酸化甘油溶血试验、蔗糖溶血试验、酸化血清溶血试验、红细胞膜蛋白电泳分析。

　　1.红细胞渗透脆性试验

　　(1)原理：检测红细胞对不同浓度低渗盐溶液的抵抗力。红细胞在低渗盐溶液中，当水渗透其内部达一定程度时，红细胞发生膨胀破裂。根据不同浓度的低渗盐溶液中红细胞溶血的情况，通过红细胞表面积与容积的比值，反映其对低渗盐溶液的抵抗性。比值愈小，红细胞抵抗力愈小，渗透脆性增加。反之抵抗力增大。

　　参考值：开始溶血0.44%～0.42%(NaCl液)，完全溶血0.34%～0.32%(NaCl液)。

　　(2)临床意义：脆性增高见于遗传性球形细胞增多症、椭圆形细胞增多症等;降低见于阻塞性黄疸、珠蛋白生成障碍性贫血、缺铁性贫血等。

　　2.自身溶血试验及其纠正试验

　　(1)原理：红细胞在37℃孵育48小时，其间由于膜异常引起钠内流倾向明显增加，ATP消耗过多;或糖酵解途径酶缺乏所引起ATP生成不足等原因可导致溶血，称为自身溶血试验。在孵育时，加入葡萄糖或ATP作为纠正物，观察溶血可否有一定的纠正，称为纠正试验。

　　参考值：48小时内不加纠正物的溶血度小于3.5%，加葡萄糖溶血度小于1.0%，加ATP的溶血度小于l.0%

　　(2)临床意义：膜缺陷患者溶血度增加，加纠正物可被纠正;G6PD缺陷症者溶血度轻度增加，能被葡萄糖纠正;自身免疫性溶贫溶血度轻度增加，加葡萄糖无预示价值;PNH本试验常正常。

　　3.酸化甘油溶血试验

　　(1)原理：当甘油存在于低渗溶液氯化钠磷酸缓冲液时，可阻止其中的水快速进入红细胞内，使溶血过程缓慢。但甘油与膜脂质又有亲和性，可使膜脂质减少。当红细胞膜蛋白及膜脂质有缺陷时，它们在pH6.85甘油缓冲液中比正常红细胞溶解速度快，导致红细胞悬液的吸光度降至50%的时间(AGLT50)明显缩短。

　　参考值：AGLT50大于1800s(30min)

　　(2)临床意义：减少见于遗传性球形细胞增多症(25～150s)、肾功能衰竭、慢性白血病、自身免疫性溶贫和妊娠妇女。

　　4.蔗糖溶血试验：为PNH简易重要的筛查试验。

　　(1)原理：是根据PNH患者的红细胞，在低离子强度医学教育网收集整理的蔗糖溶液中对补体敏感性增强，经孵育，补体与红细胞膜结合加强，蔗糖溶液进入红细胞内，导致渗透性溶血而设计的。

　　参考值：定性试验：正常为阴性;定量试验：正常溶血率<5%。

　　(2)临床意义：PNH患者为阳性或溶血率增加，可作为PNH的筛选试验。自免溶贫有的可为阳性，白血病、骨髓硬化时可出现假阳性。

　　5.酸化血清溶血试验

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　　(1)原理：阵发性睡眠性血红蛋白尿症(PNH)患者体内存在对补体敏感的红细胞。酸化血清溶血试验，也称Ham test，即红细胞在酸性(pH6.4～6.5)的正常血清中孵育，补体被激活，PNH红细胞破坏而产生溶血。而正常红细胞不被溶解，无溶血现象。

　　结果：阴性。

　　(2)临床意义：是PNH的确诊试验。阳性主要见于PNH，某些自身免疫性溶血性贫血发作严重时可呈阳性。

　　6.红细胞膜蛋白电泳分析

　　(1)原理：将制备的红细胞膜样品进行SDS-PAGE电泳，根据样品中各蛋白相对分子质量的不同，分离得到红细胞膜蛋白的电泳图谱，从而可见各膜蛋白组分百分率。

　　参考值：各种膜蛋白组分百分率变化较大，多以正常红细胞膜蛋白电泳图谱作比较。或以带3蛋白为基准，各膜蛋白含量以与带3蛋白的比例表示。

　　(2)临床意义：许多溶血性疾病常见红细胞膜蛋白异常。各种膜缺陷疾病如遗传性球形红细胞增多症有收缩蛋白等含量减低或结构异常。某些血红蛋白病骨架蛋白等可明显异常。