2013微生物与寄生虫检验：细菌感染的分子生物学检测

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　　(一)常用的分子生物学技术

　　1.核酸杂交 常用的杂交技术有：斑点杂交、southern印迹、原位杂交、Northern印迹等。探针的种类有全染色体DNA探针、染色体克隆片段DNA探针、质粒DNA探针、rRNA基因探针、寡核苷酸探针等。

　　2.核酸扩增技术 核酸扩增技术是分子生物学中最具有重大意义的技术之一。对核酸进行扩增的方法很多，如聚合酶链反应(polymerase chain reaction ，PCR)、连接酶链反应、自保留序列扩增及Q-beta扩增等。以聚合酶链反应最为广泛应用。

　　PCR技术在细菌的快速检测、细菌的毒素基因检测、细菌的耐药性检测及感染细菌的流行病学调查中得到日益广泛的应用。

　　生物芯片是新近发展的一项对基因、蛋白质、细胞及其他生物组分进行大信息量分析的检测技术。常用的有基因芯片(gene chips)和蛋白芯片(protein chips)。目前正在研制和评价中。

　　(二)鉴定感染细菌种属的方法

　　1.细菌种属的鉴定

　　DNA碱基组成的测定 G+C mol%含量不同的细菌，为不同种细菌;含量相同的可能为不同种的细菌。细菌的G+C mol%相当稳定，不受培养条件、菌龄和其他外界因素影响。最常用的方法是热变性法。

　　DNA-DNA杂交 DNA杂交可得出DNA之间核苷酸顺序的互补程度，从而推断不同细菌基因组间的同源性。

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