2022初级检验技师临床检验基础考点：血液细胞染色

2022初级检验技师临床检验基础考点：血液细胞染色

1.瑞氏染色法

瑞氏染色法是最经典、最常用染色法，尤其对于细胞质成分、中性颗粒等可获得很好的染色效果，但对细胞核的着色能力略差。姬姆萨染液对细胞核、寄生虫(如疟原虫等)着色较好，结构更清晰，但对细胞质成分的着色能力略差。采用瑞氏一姬姆萨复合染液可使细胞胞质、颗粒、胞核等均获得满意的染色效果。

瑞氏染料的质量规格用吸光度比值(rA)来评价，rA测定方法：取瑞氏染液15～25μl，加甲醇10ml稀释，混匀，以甲醇为空白管，分别在波长650nm(美蓝吸收峰波长)、525nm(伊红吸收峰波长)测定吸光度(rA=A650/A525)。新配制染料rA接近2，随美蓝逐渐氧化为天青B(其吸收峰为650nm，吸光度约为美蓝一半)，rA也下降，降到1.3±0.1时，染料即可使用。新鲜配制的染料偏碱，须在室温或是37℃下贮存一定时间，待美蓝逐渐变为天青B，贮存时间愈久，染色效果愈好。在贮存过程中，必须加塞，以防甲醇挥发(如加甘油)和氧化成甲酸，所用甲醇须为AR级，若其中含过多丙酮，会使染色偏酸，白细胞着色不良。

2.吉姆萨染色法

吉姆萨染液由天青，伊红组成。染色原理和结果与瑞特染色法基本相同。嗜酸性颗粒为碱性蛋白质，与酸性染料伊红结合，染粉红色，称为嗜酸性物质，细胞核蛋白和淋巴细胞胞浆为酸性，与碱性染料美蓝或天青结合，染紫蓝色，称为嗜碱性物质，中性颗粒呈等电状态与伊红和美蓝均可结合，染淡紫色，称为中性物质。

PH对细胞染色有一些影响。细胞里各种成分均不蛋白质，因为蛋白质系两性电解质，带电荷随溶液PH而定，在偏酸性环境里下在电荷增多，易和伊红结合，染色为偏红，在偏三性环境里负电荷增多，易和美蓝或天青结合，染色偏蓝。所以细胞染色对氢离子浓度十分敏感，染色用正经片一定清洁，要无酸碱污染。配制顼特液一定用优质甲醇，稀释染色一定用缓冲液，冲洗一定用水应近中性，不然可导致各种细胞染色反应异常，以致于识别困难，甚至造成错误的。

一般性操作技术血涂片制备、细胞染色、显微检查、血液病诊断、染色不良。

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