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初级检验技士辅导:志贺菌属微生物检验

更新时间:2011-02-14 10:51:06 来源:|0 浏览0收藏0

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  初级检验技士辅导:志贺菌属微生物检验 $lesson$

  微生物检验

  1、标本采集:尽可能在发病早期及在治疗前采集新鲜粪便,选择粘液脓血便,必要时可用肛拭子采集。

  2、检验方法及鉴定:

  (1)分离培养:取粪便(粘液或脓血部分)或肛拭标本接种GN肉汤增菌及再进行分离培养。一般同时接种强弱选择性不同的两个平板。强选择性鉴别培养基可用沙门、志贺菌选择培养基(SS);弱选择培养基可用麦康凯或中国蓝培养基。培养18-24小时后选取可疑菌落进行下列鉴定。

  (2)鉴定:

  1)初步鉴定:挑选可疑菌落3-4个先用志贺菌属多价诊断血清作试探性玻片凝集试验。将试探性凝集试验阳性的菌落至少接种2-3支KIA(克氏双糖)和MIU(动力、吲哚、脲酶),经35℃18-24小时,凡符合KIA:K/A、产气-/+、H2S,MIU:动力-、吲哚、脲酶-,氧化酶-,并结合试探性玻片凝集试验阳性结果可鉴定为志贺菌属。

  2)最后鉴定:增加甘露醇(+/-)、蔗糖(-/+)(宋内志贺菌属迟缓阳性)、柠檬酸盐(-)、苯丙氨酸脱氨酶(-)、ONPG(β-半乳糖苷酶)及鸟氨酸脱羧酶(-)(宋内志贺菌属为阳性);用志贺菌属的诊断血清作群型鉴定。A群痢疾志贺菌,甘露醇阴性,10个血清型。B群福氏志贺菌,有6个血清型和X、Y2个变种。C群鲍氏志贺菌,15个血清群。D群宋内志贺菌,仅有一个血清型,有光滑型和粗糙型两种菌落。

  3、与大肠埃希菌的鉴别

  (1)无动力,不发酵乳糖,靛基质阴性,赖氨酸阴性。

  (2)发酵糖产酸不产气(福氏志贺菌6型、鲍氏志贺菌13和14型、痢疾志贺菌3型除外)。

  (3)分解黏液酸,在醋酸盐和枸橼酸盐琼脂上产碱。

  4、与类志贺邻单胞菌和伤寒沙门菌的鉴别:

  可用动力和氧化酶试验加以鉴别,志贺菌为阴性,而类志贺邻单胞菌为阳性。

  伤寒沙门菌硫化氢和动力阳性,能与沙门菌属因子血清凝集而不与志贺菌属因子血清凝集。

  (四)临床意义

  致病因素为侵袭力、内毒素及外毒素。可引起人类细菌性痢疾,其中可分急性、慢性两种,小儿易引起急性中毒性痢疾。慢性痢疾可人-人之间传播,污染水和食物可引起爆发流行。

  (五)防治原则

  人工主动免疫用于预防尚不够理想,预防的主要措施是防止进食被污染的食品、饮料及水,及早发现及早积极治疗携带者。

  临床治疗要根据体外药敏试验结果选用抗生素及其他抗痢疾药物,保持水和电解质平衡。对于中毒性痢疾患者应采用综合性治疗措施,如升压、抗休克、抗呼吸衰竭等。治疗细菌性痢疾一般首选氟奎诺酮类药物。

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