临床执业医师辅导:DNA变性及其应用
更新时间:2010-04-14 15:20:19
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临床执业医师辅导:DNA变性及其应用
(1)DNA变性和复性的概念
在极端的pH值(加酸和碱)和受热条件下,DNA分子中双链间的氢键断裂,双螺旋结构解开,这就是DNA的变性。DNA的酸、碱变性与DNA热变性有所不同。DNA的热变性又称为DNA的解链或融解作用。在DNA热变性过程中,使紫外吸收达到最大增值50%时的温度称为解链温度,又称融解温度(Tm)。Tm与DNA分子G+C量有关。复性指的是核酸双链分子中分开的两股单链重新结合。
(2)核酸杂交
如果将不同的DNA链放在同一溶液中作变性处理,只要某些有形成碱基配对的可能,它们之间就可形成局部双链,这一过程称为核酸杂交,生成的双链为杂化双链。还有一种核酸探针技术,采用一小片段核苷酸单链,用放射性核素或生物素等化学发光物质标记,就可以作为探针进行核酸杂交研究。
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