2010年医学免疫学课堂讲义(第二十二讲)

　　第二十二讲 免疫诊断

　　免疫学检测技术主要包括抗原、抗体的检测以及免疫状态的测定，可广泛运用于生物 学和医学研究的各个领域，也是临床辅助诊断的重要手段。

　　一、抗原或抗体的检测

　　(一) 基本原理

　　1. 特异性转自环 球 网校edu24ol.com

　　2. 可逆性

　　*亲和力(affinity)和亲合力(avidity)

　　3. 可见性(最适比例)

　　4. 一抗与二抗

　　(二) 血清学方法

　　1. 凝集反应 凝集反应是指颗粒性抗原与相应抗体结合后形成大小不等凝集块的现象。

　　(1)直接凝集反应

　　(2)间接凝集反应

　　2. 沉淀反应 沉淀反应：指可溶性抗原与相应抗体结合后形成肉眼可见沉淀物的现象。

　　(1)单向免疫扩散试验

　　(2)双向免疫扩散试验

　　(3)免疫电泳

　　(4)免疫比浊

　　(三)免疫标记技术转自环 球 网校edu24ol.com

　　1. 免疫荧光法 用荧光素标记的抗体(抗原)与组织或细胞中的相应抗原(抗体)结合，借助于荧光

　　显微镜或流式细胞仪对抗原(抗体)进行鉴定或定位。

　　(1)直接法

　　(2)间接法

　　2. 酶联免疫吸附试验(ELISA) 以固相载体吸附(称为包被)已知的抗原或抗体，通过这些抗原(抗体)结合标本中

　　的抗体(抗原)，再加入酶标记的抗体或二抗，最后通过酶催化底物形成有色产物来检测 标本中的抗体或抗原。分为：

　　(1)间接法

　　(2)双抗体夹心法

　　3. 放射免疫分析 以放射性核素标记抗原，通过竞争结合的原理，使标本中待检抗原与标记抗原竞争结

　　合有限的抗体，两者比例的差别可造成结合相与游离相中放射性含量的变化。测定结合相 中的放射性强度，可推测标本中待检抗原含量。有液相法与固相法之分。

　　二、免疫细胞的测定

　　(一) 淋巴细胞的分离与类型鉴定转自环 球 网校edu24ol.com

　　1. 免疫细胞分离技术

　　(1)根据细胞的密度、黏附性能、表面标志等，采用不同方法分离外周血单个核细胞、 淋巴细胞及不同亚群。

　　2. 淋巴巴细胞亚群的鉴定

　　(1)免疫荧光法(流式细胞术)

　　(2)抗原肽-MHC 分子四聚体技术

　　(二) 免疫细胞功能测定

　　1. T 细胞功能测定

　　(1)T 细胞增殖试验

　　a. 3H-TdR掺入法

　　b. MTT 法

　　(2)细胞毒试验

　　a. 51Cr释放法

　　b. 乳酸脱氢酶释放法

　　c. 凋亡细胞检查法

　　(3)细胞因子检测

　　a. 生物活性测定法转自环 球 网校edu24ol.com

　　b. 免疫学检测法

　　c. 聚合酶链反应(PCR)

　　2. B 细胞功能测定

　　(1)B 细胞增殖试验

　　(2)抗体形成细胞测定

　　三、免疫学检测方法的临床应用

　　(一)疾病诊断

　　1. 感染性疾病

　　2. 免疫缺陷病

　　3. 自身免疫病

　　4. 超敏反应性疾病

　　5. 肿瘤

　　(二)免疫学监测

　　1. 辅助诊断

　　2. 疗效判断转自环 球 网校edu24ol.com

　　3. 病情分析

　　4. 预后判断

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