临床执业医师医学微生物学第一讲：(2)

　　临床执业医师医学微生物学第一讲：(2)

　　(八)细菌感染的检查方法与防治原则

　　同学们应重点掌握：1.细菌学诊断(1)标本的采集原则(2)检验程序

　　2.血清学诊断：常用的血清学诊断方法

　　3.人工主动免疫和人工被动免疫(1)适应性(特异性免疫)的获得方式(2)人工免疫的概念和常用的免疫制剂

　　1.细菌学诊断

　　(1)标本的采集原则：严格无菌操作，在抗生素使用之前采集，采样后尽快冷藏送检及做好标记。

　　(2)病原菌的检测程序：依次是标本的采集，直接镜检，病原微生物分离培养，抗原检测、分子生物学技术检测微生物特异性DNA或RNA、免疫学试验。

　　2.血清学诊断

　　(1)酶联免疫吸附试验(ELISA)、放射免疫试验(RIA)及免疫荧光试验(IF)

　　ELISA、RIA及IF均为用于检测感染者血清中特异性抗体或抗原的方法，均为应用标记的抗原检测血清中抗异性抗体，或应用标记的抗体检测血清中特异性抗原。

　　(2)蛋白印迹试验(Western blot，WB)

　　蛋白印迹试验(WB)是在ELISA应用原理基础上发展的一项新技术，用于检测微生物的特异性蛋白抗原或患者相对应的蛋白抗体的实验室诊断方法。若用此试验检测患者血清特异性抗体，可用已知微生物蛋白抗原捕捉患者血清中特异性抗体，再结合酶标记抗人抗体并观察结果。

　　(3)中和试验(NT)

　　中和试验(NT)为在检测病原微生物(病毒、细菌等)的血清学试验过程中，先在被检血清或其他液体标本中加人已知的特异性抗体或抗原，使其发生中和反应后，再检测被检血清中其特异性抗原或抗体。

　　(4)试管凝集试验

　　肥达氏试验是辅助诊断伤寒或副伤寒病常用的一种血清学试验，即用已知伤寒沙门氏菌的菌体抗原(O抗原)、鞭毛抗原(H抗原)及甲型或乙型副伤寒杆菌的鞭毛抗原(PA或PB抗原)，测定人血清中相应抗体效价。

　　3.人工主动免疫和人工被动免疫

　　(1)适应性免疫(特异性免疫)的获得方式：对某种感染性疾病的特异性免疫可由病后天然免疫和人工免疫获得。人工免疫又分为人工主动免疫与人工被动免疫。

　　(2)人工免疫的概念

　　①人工主动免疫：是用人工接种的方法给机体注射抗原性物质(疫苗)，使机体免疫系统因受抗原刺激而产生体液和细胞免疫应答的过程。此种免疫应答出现较晚，维持时间较长，多用于疾病的预防。

　　②人工被动免疫：为将含有特异性抗体的免疫血清或免疫细胞因子等制剂，直接注入机体，使之立即获得免疫力。此种免疫持续时间短。

　　(3)常用的免疫制剂

　　1)人工主动免疫制剂：

　　①减毒活菌(疫)苗：如卡介苗、布氏杆菌减毒活菌苗等。

　　②灭活菌(疫)苗：如伤寒、百日咳及霍乱死疫苗等。

　　③类毒素：为细菌外毒素经0.3%~0.4%甲醛液处理后，其毒性消失，但仍保留抗原性的生物制品。

　　④亚单位疫苗：如脑膜炎球菌和肺炎球菌的荚膜多糖疫苗。

　　⑤基因重组疫苗或称基因工程疫苗：将微生物特异性抗原表达基因，与工程菌(如酵母菌)充足并表达蛋白质产物，经纯化制成疫苗。最成功的为乙型肝炎重组疫苗。

　　⑥ DNA疫苗：是将编码病原表面某种具有保护性免疫作用的抗原基因插入酵母菌，使之表达目的基因。处于研究阶段。

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